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5301星形細胞培養(yǎng)基的使用規(guī)范

更新時間:2025-06-23      點擊次數:333
  5301星形細胞培養(yǎng)基是一種專門用于星形膠質細胞培養(yǎng)的無菌、液體培養(yǎng)基,通常包含基礎培養(yǎng)基、胎牛血清、生長因子、抗生素等成分。
  5301星形細胞培養(yǎng)基使用規(guī)范:
  1.細胞接種
  細胞密度:星形細胞接種密度根據細胞代次和狀態(tài)調整。
  預處理:接種前用培養(yǎng)基預潤培養(yǎng)瓶/皿,避免細胞干燥損傷。
  2.培養(yǎng)條件
  溫度:37℃恒溫培養(yǎng)。
  氣體環(huán)境:5%CO2(維持pH穩(wěn)定),部分星形細胞可能需要低氧條件。
  換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基,避免代謝產物積累導致細胞毒性。
  3.傳代與凍存
  消化方法:用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液輕柔消化,血清終止消化。
  凍存:使用含10%DMSO的凍存培養(yǎng)基,程序降溫后轉入-80℃或液氮保存。
  5301星形細胞培養(yǎng)基注意事項:
  1.避免污染
  操作前紫外線消毒超凈工作臺30分鐘,佩戴手套和口罩。
  開封的培養(yǎng)基需在1個月內用完,避免反復凍融(可分裝為單次用量)。
  2.血清質量控制
  胎牛血清需經過檢測(如支原體、病毒、內毒素),熱滅活可滅活補體成分。
  不同批次血清可能影響細胞狀態(tài),建議批量采購并測試。
  3.生長因子保存
  bFGF/EGF需分裝為小劑量,-20℃保存,避免反復凍融失效。
  4.特殊需求調整
  原代細胞培養(yǎng):可能需要添加更高濃度血清或基質包被。
  分化誘導:去除生長因子并添加低血清可誘導星形細胞分化。

 

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